Ia memainkan peranan penting dalam proses kehidupan, memfosforilasi Tyrr, Ser, Thr, terletak pada peptida.Asid amino terfosforilasi biasanya digunakan dalam penghasilan peptida asid fosforik, yang kini digunakan dalam asid amino terfosforilasi fenil tunggal.HBTU/asid amino terfosforilasi biasanya digunakan untuk menyambungkan kaedah HOBt/DIEA asid amino terfosforilasi, tetapi peptida asid fosforik memilih kecacatan pendekatan ini, terutamanya dalam peptida peptida yang lebih lama atau asid amino fosfat yang dihasilkan, menyambung kecekapan adalah rendah, rendah. kesucian produk akhir.Untuk fosfopeptida ini, kami menganggap pendekatan pasca fosforilasi terpilih.Proses penjanaan ialah penyingkiran terpilih kumpulan pelindung rantai sisi asid amino yang perlu dilabelkan selepas sintesis peptida.Untuk Tyr, Thr boleh bertindak balas secara langsung menggunakan asid amino dengan rantai sampingan yang tidak dilindungi.-Ser (trt), dikeluarkan secara kuantitatif pada persekitaran 1%TFA /DCM.
Fosforilasi, dengan dua benzena phosphite phosphoramide dan empat nitrogen dijana dan phosphoramide tetrazolium perantaraan aktif, disambungkan kepada hidroksi, kemudian di bawah pembentukan fosforil pengoksidaan asid peroksida, tindak balas lengkap.
Pada masa ini, kaedah pengubahsuaian fosforilasi peptida terdapat dua jenis utama:
(1) pengenalan langsung asid amino terfosforilasi sederhana yang dijamin ke dalam urutan polipeptida;
(2) selepas resin yang dihasilkan pada jujukan peptida, kepada Ser, Tyr, atau Thr fosforilasi rantai sampingan hidroksil.
1) akan menjamin sederhana asid amino terfosforilasi secara langsung memperkenalkan urutan peptida:
Iaitu, asid amino yang perlu difosforilasi akan difosforilasi dan dilindungi dengan sewajarnya terlebih dahulu menggunakan (Thr,Ser atau Tyr), dan kemudian fosforilasi akan disempitkan ke titik pemilihan indeks polipeptida berdasarkan proses penjanaan SPPS biasa .Kaedah ini adalah mudah untuk beroperasi, telah menjadi kaedah utama perusahaan peptida pengubahsuaian fosforilasi.
2) selepas resin dijana pada jujukan peptida, kepada Ser hidroksi fosforilasi, Tyr, atau rantai sampingan Thr:
Hiasan fosforilasi menggunakan fosforilasi penguncupan tunggal ke dalam kaedah polipeptida, disebabkan oleh halangan sterik yang dihasilkan oleh kumpulan besar dalam hiasan rantai sisi, adalah sukar untuk fosforilasi asid amino mengecut dengan rantaian peptida.Pada masa akan datang, pengenalan asid amino akan menjadi lebih sukar, terutamanya dalam hiasan yang mengandungi pelbagai tapak fosforilasi, penjanaan akan menjadi sangat sukar, komposisi produk akhir adalah kompleks, sukar untuk dipisahkan, dan hasil sangat rendah.
Oleh itu, apabila beberapa tapak dalam rantai peptida difosforilasi, seseorang boleh memilih untuk menjana jujukan peptida pada resin dan kemudian memfosforilasinya dengan kumpulan hidroksil rantai sampingan Ser, Tyr, atau Thr: penjanaannya terutamanya melibatkan penyingkiran terpilih kumpulan pelindung rantai sisi yang memerlukan pengiktirafan asid amino selepas sintesis peptida.Untuk Tyr, Thr boleh terus menggunakan rantai sampingan asid amino yang tidak dilindungi sebagai tindak balas.
Pangkalan perlindungan rantai sisi 1% persekitaran TFA/DCM boleh dikeluarkan secara kuantitatif.Apabila kaedah ini dipilih, perantaraan aktif tetrazolium fosforamidit boleh dihasilkan menggunakan dibenzyl phosphoramidite dan tetrazolium, dikaitkan dengan kumpulan hidroksil, dan kemudian dioksidakan untuk membentuk kumpulan fosforil dalam persekitaran asid peroksi untuk melengkapkan tindak balas.
Masa siaran: Sep-08-2023