Dalam penyelidikan biologi, polipeptida dengan urutan yang panjang biasanya digunakan.Untuk peptida dengan lebih daripada 60 asid amino dalam urutan, ekspresi gen dan SDS-PAGE biasanya digunakan untuk mendapatkannya.Walau bagaimanapun, kaedah ini mengambil masa yang lama dan kesan pemisahan produk akhir adalah tidak baik.
Cabaran dan penyelesaian untuk sintesis peptida panjang
Dalam sintesis peptida panjang, kita sentiasa berhadapan dengan masalah, iaitu, halangan sterik tindak balas pemeluwapan meningkat dengan peningkatan urutan dalam sintesis, dan masa tindak balas perlu diselaraskan untuk membuat tindak balas selesai.Walau bagaimanapun, lebih lama masa tindak balas, lebih banyak kesan sampingan dihasilkan, dan sebahagian daripada peptida sasaran terbentuk.Sisa sedemikian - rantaian peptida yang kekurangan adalah kekotoran utama yang dihasilkan dalam sintesis peptida yang panjang.Oleh itu, dalam sintesis peptida panjang, masalah utama yang mesti kita atasi ialah meneroka keadaan tindak balas yang berkualiti tinggi dan kaedah tindak balas, untuk menjadikan tindak balas pemeluwapan asid amino lebih komprehensif dan penuh.Di samping itu, kurangkan masa tindak balas, kerana semakin lama masa tindak balas, semakin banyak tindak balas sampingan yang tidak terkawal, semakin kompleks produk sampingan.Oleh itu, tiga perkara berikut diringkaskan:
Sintesis gelombang mikro boleh digunakan: Bagi sesetengah asid amino yang ditemui dalam proses sintesis yang tidak mudah disepadukan, sintesis gelombang mikro boleh digunakan.Kaedah ini mempunyai hasil yang luar biasa, dan sangat mengurangkan masa tindak balas, dan mengurangkan pembentukan dua produk sampingan utama.
Kaedah sintesis serpihan boleh digunakan: Apabila sesetengah peptida sukar untuk disintesis melalui kaedah sintesis biasa dan tidak mudah untuk ditulenkan, kita boleh mengguna pakai keseluruhan pemeluwapan beberapa asid amino dalam segmen tertentu peptida kepada rantai peptida secara keseluruhan.Kaedah ini juga boleh menyelesaikan banyak masalah dalam sintesis.
Sintesis asilhidrazida boleh digunakan: sintesis acylhydrazide peptida ialah kaedah sintesis fasa pepejal peptida Cys terminal N dan polipeptida hidrazida C-terminal tindak balas selektif kimia antara pembentukan ikatan amida untuk mencapai kaedah ikatan peptida.Berdasarkan kedudukan Cys dalam rantai peptida, kaedah ini membahagikan keseluruhan rantai peptida kepada beberapa jujukan dan mensintesisnya masing-masing.Akhirnya, peptida sasaran diperoleh melalui tindak balas pemeluwapan fasa cecair.Kaedah ini bukan sahaja mengurangkan masa sintesis peptida panjang, tetapi juga meningkatkan ketulenan produk akhir dengan ketara.
Pembersihan peptida yang panjang
Keistimewaan peptida panjang tidak dapat dielakkan membawa kepada komponen kompleks peptida mentah.Oleh itu, ia juga merupakan satu cabaran untuk membersihkan peptida panjang oleh HPLC.siri amiloid proses penulenan polipeptida, menyerap banyak pengalaman dan berjaya digunakan dalam penulenan peptida panjang.Dengan mengguna pakai peralatan baharu, mencampurkan pelbagai sistem penulenan, pengasingan berulang dan kaedah pengalaman lain, kadar kejayaan penulenan peptida panjang telah bertambah baik.
Masa siaran: Apr-18-2023