Antigen protein rekombinan selalunya mempunyai beberapa epitop yang berbeza, sebahagian daripadanya ialah epitop jujukan dan sebahagian lagi adalah epitop berstruktur.Antibodi poliklonal yang diperoleh dengan mengimunkan haiwan dengan antigen yang didenaturasi ialah campuran antibodi khusus untuk epitop individu dan boleh digunakan secara umum untuk mengesan struktur semula jadi atau protein sasaran yang didenaturasi.Faedah sampingan menggunakan protein yang didenatur sebagai imunogen ialah protein yang didenaturasi cenderung lebih imunogenik dan boleh merangsang tindak balas imun yang kuat pada haiwan.
Sistem ekspresi Escherichia coli biasanya dipilih untuk tujuan antigen kerana ia adalah sistem yang paling mahal dari segi masa dan wang.Untuk meningkatkan kemungkinan ekspresi protein sasaran dan kemudahan penulenan, kadangkala hanya serpihan kecil protein sasaran, seperti domain tertentu, dinyatakan.
Struktur tiga dimensi protein
Domain Khusus Protein
Jika tujuan penyediaan antibodi adalah semata-mata untuk pengesanan wb, adalah menjimatkan dan pantas untuk menggunakan peptida kecil sintetik sebagai antigen, tetapi terdapat risiko imunogenisiti yang lemah atau tidak regenisiti disebabkan pemilihan segmen peptida yang tidak sesuai.Memandangkan penyediaan antibodi memerlukan tempoh yang panjang, dua atau tiga segmen peptida yang berbeza sering dipilih untuk menyediakan antibodi menggunakan antigen polipeptida bagi memastikan kadar kejayaan eksperimen.
Ketulenan antigen polipeptida untuk imunisasi diperlukan lebih besar daripada 80%.Walaupun ketulenan yang lebih tinggi secara teorinya boleh memperoleh antibodi dengan kekhususan yang lebih baik, dalam amalan, haiwan sentiasa menghasilkan sejumlah besar antibodi tidak spesifik, dengan itu menutupi faedah ketulenan antigen.
Di samping itu, penyediaan antibodi daripada peptida kecil mesti dikait silang dengan antigen pembawa yang sesuai untuk meningkatkan imunogeniknya.Dua pembawa antigenik biasa ialah KLH dan BSA.
Masa siaran: Mac-23-2023